البيوتين الببتيدات

ما هي الببتيدات الحيوية؟

الببتيدات المحتوية على البيوتين هي الببتيدات التي تم تعديلها لتشمل شاردة البيوتين. يستفيد هذا التعديل من التفاعل -العالي التقارب بين البيوتين والأفيدين أو الستربتافيدين، والذي يستخدم على نطاق واسع في التطبيقات البيولوجية والكيميائية الحيوية. جزيء البيوتين صغير ومستقر ولا يغير بشكل كبير بنية الببتيد أو وظيفته، مع تمكين الالتقاط أو الكشف بكفاءة عالية من خلال الأنظمة المستندة إلى avidin-.

 

التعديل الكيميائي
يتم تقديم البيوتين عادةً من خلال كاشف -البيوتين (N-}hydroxysuccinimide biotin) التابع لهيئة الخدمات الصحية الوطنية (NHS)، والذي يتفاعل مع مجموعات الأمين الأولية الموجودة على الطرف N- من الببتيد أو بقايا اللايسين، مما يشكل رابطة أميد مستقرة.

生物素(البيوتين) 肽(الببتيد)

COOH NH₂

| |

+---EDC/NHS---→ 活化羧基(التنشيط) → 缩合(اقتران)

↓ ↓

البيوتين-CONH-الببتيد

 

تفاعل التقارب
يمكن أن يرتبط الببتيد المعالج بالبيوتينيل بقوة (Kd ~10⁻¹⁵ M) بالأفيدين أو الستربتافيدين، مما يجعله مثاليًا للاستخدام في الاختبارات التي تتطلب الكشف الدقيق أو الالتقاط أو التثبيت.

حالات تخليق الببتيد الحيوي

تسلسل الببتيد: البيوتين-Ahx-YXXXXXXRXRRR-NH2

الطول: 11 أ

Purity: >95%

M.W: 1898.32

تسلسل الببتيد: البيوتين-YXXXXXXRXRRR--ERXXXDLXXXXPVXXXXPRR

الطول: 31 أ

Purity: >95%

M.W: 4145.89

 

تطبيقات الببتيدات الحيوية

الببتيدات المحتوية على بيوتينيل هي أدوات متعددة الاستخدامات في البحث والصناعة، مع مجموعة واسعة من التطبيقات، بما في ذلك:

تنقية الألفة

يستخدم لتنقية شركاء الارتباط مثل البروتينات أو الأجسام المضادة أو الأحماض النووية عن طريق تثبيت الببتيد المعالج بالبيوتينيل على حبات الستربتافيدين.

ELISA والنشاف الغربي

تعمل الببتيدات المحتوية على بيوتينيل كمسبارات لاكتشاف تفاعلات محددة عندما تقترن بملصقات الفلورسنت avidin-HRP أو avidin-.

رنين البلازمون السطحي (SPR)

يستخدم لشل حركة الببتيدات على رقائق المستشعر الحيوي لدراسات التفاعل.

اكتشاف المخدرات

فحص المرشحين للأدوية من خلال تحليل ارتباطهم بأهداف الببتيد المعززة بالبيوتينيل.

علم المناعة

يتم استخدام الببتيدات المحتوية على بيوتينيل لرسم خريطة للحواتم ودراسة تفاعلات الأجسام المضادة لمولد الضد -وإجراء فحوصات الخلايا التائية.

رسم خرائط الحاتمة لتطوير اللقاحات

تم استخدام الببتيد المخصص بيولوجيًا لتحديد الحواتم المستضدية للبروتين الفيروسي، مما يساعد في تصميم مرشح للقاح.

البروتين-دراسات تفاعل البروتين

أتاحت الببتيدات المحتوية على البيوتينيل المثبتة على الصفائح المغطاة بالستربتافيدين-دراسة تفاعلات الروابط بين المستقبلات-، مما كشف عن ارتباطات الارتباط الحاسمة لتطوير الدواء.

تحسين المقايسة المناعية

في اختبار تشخيصي، تم استخدام الببتيدات المحتوية على بيوتينيل كمستضدات لتحسين حساسية ونوعية ELISA للكشف عن العلامات الحيوية للمرض.

 

مراجع

1. جرين، نيو مكسيكو (1975).أفيدين و ستريبتافيدين.مجلة الكيمياء الحيوية, 131(3)، 781-791.

2. شايت، إل.، وولف، إف جيه (1964).خصائص الستربتافيدين، وهو بروتين مرتبط بالبيوتين-يتم إنتاجه بواسطة الستربتوميسيس.أرشيف الكيمياء الحيوية والفيزياء الحيوية، 106(1)، 1-5.

3. فين، FM، وتيتوس، ج. (1994).Biotinylation من البروتينات في البحوث والتكنولوجيا الحيوية.الكيمياء الحيوية الشرجية, 218(1), 1-7.