-
الهاتف
+86-0755 2308 4243
-
عنوان
غرفة 309، مبنى ميهوا، مجمع تايوان الصناعي، رقم 2132 طريق سونغباي، منطقة باوان، شنتشن، الصين
-
البريد الإلكتروني
التعليمات
ما هي منهجيات التوليف التي يستخدمها Biorunstar لتخليق الببتيد؟
إعادة: لقد طورت Biorunstar منهجيات تركيب مختلفة لمرحلة الحل لتلبية متطلبات العملاء. عادة، يتم تطبيق كيمياء المرحلة الصلبة Fmoc.
كيف تقوم بشحن الببتيدات؟ ما هي بيانات مراقبة الجودة التي سيتم توفيرها؟
إعادة: سيتم شحن جميع الببتيدات عن طريق DHL أو FedEx Express كما هو الحال في المسحوق المجفف بالتجميد في قوارير فردية ذات علامات جيدة، في درجة حرارة الغرفة. باستثناء الببتيدات الخام، والتي سيتم فحصها فقط بواسطة مقياس الطيف MALDI-MASS، تأتي جميع الببتيدات الاصطناعية المنقاة مع تقرير المشروع (CoA)، وبيانات MS وبيانات HPLC. سيتم توفير أوراق البيانات التي تحتوي على الخصائص الرئيسية، مثل تسلسل الببتيد والنقاء والكمية والتعديل وبيانات الطيف الكتلي وبيانات HPLC.
ما هو الوقت المثالي لتخليق الببتيد؟ كم من الوقت يستغرق الشحن لي؟
رد: وقت التسليم النموذجي لدينا هو 2-3 أسابيع للببتيد القياسي الذي يقل عن 30 حمضًا أمينيًا. يختلف وقت الدوران اعتمادًا على طول الببتيد وكميته وقابليته للذوبان والصعوبة. عادةً ما يستغرق الأمر 3-5 يومًا للوصول إلى الباحثين في البلدان الأخرى.
متى يمكنك توليف؟
رد: تتمتع شركة Biorunstar بخبرة واسعة في تصنيع الببتيدات الطويلة، التي تصل إلى 130AA. على عكس العديد من موردي الببتيد الذين يشعرون بالارتياح فقط في صنع الببتيدات تحت 30 أو 40aa، تتمتع Biorunstar بخبرة جيدة في صنع الببتيدات التي تتراوح من 40aa إلى 90aa. من الصعب تصنيع الببتيدات الطويلة، خاصة 100aa أو أكثر. إذا كنت تخطط لتجميع تسلسل 130AA أو أكثر، فيرجى الاتصال بنا للحصول على خدمة مخصصة للتعبير عن البروتين وتنقيته.
ماذا لو ظهرت بعض المشاكل أثناء عملية التركيب أو التنقية؟
إعادة: كل الببتيد له خصائصه المحددة. إذا حدثت بعض المشكلات أثناء عملية التصنيع بما يتجاوز توقعاتنا، ولم نتمكن من توصيل الببتيد الخاص بك في الوقت المحدد، فسنبلغك في أقرب وقت ممكن. ومن قبيل الصدفة أننا لم نتمكن من صنع الببتيد، فلن يتم تحصيل أي تكاليف منك.
شكل ملح TFA أو ملح خلات أو حمض الهيدروكلوريك: أي شكل يجب أن أختار؟
بشكل افتراضي، يتم تصنيع الببتيدات في ملح TFA. بالنسبة للتجارب المتعلقة بزراعة الخلايا أو الأنسجة، يجب أن تفكر في إنتاج الببتيدات في شكل خلات أو ملح حمض الهيدروكلوريك بنسبة 98٪ أو أعلى لتجنب الاستجابات غير الطبيعية. يمكن طلب شكل ملح الأسيتات أو حمض الهيدروكلوريك مقابل تكلفة إضافية.
ما هي مدة صلاحية الببتيد؟
إعادة: الببتيدات مستقرة لمدة سنة واحدة على الأقل إذا تم تخزينها مجففة بالتجميد في الثلاجة. إذا تم حل الببتيدات قد يتم تقليل مدة الصلاحية. إذا كانت الببتيدات تحتوي على العديد من الأحماض الأمينية التفاعلية التي يمكن أكسدتها مثل Trp وMet ولكن بشكل خاص Cys، فقد تنخفض أيضًا مدة الصلاحية.
يحتوي الببتيد على العديد من السيستين وبالتالي يمكنه بسهولة تكوين روابط ثاني كبريتيد. كيف أتجنب هذا؟
إعادة: إذا كان تسلسل الببتيد يحتوي على العديد من السيستين، أو غيرها من الأحماض الأمينية التفاعلية، والتي تتأكسد بسهولة، فإن Biorunstar يعرض توصيل الببتيد مع آثار من مادة DTT القوية المختزلة. يتم تسليم الببتيد فقط مع DTT إذا سمح العميل بذلك على وجه التحديد.
كيف أقوم بتخزين الببتيدات الاصطناعية الخاصة بي؟
رد: معظم الببتيدات المجففة بالتجميد ستكون مستقرة في درجة حرارة الغرفة لمدة 2-3 أسبوع. للتخزين طويل الأمد، يجب عليك تخزين الببتيدات المجففة بالتجميد عند درجة -20 . وينبغي تجنب دورات التجميد والذوبان المتكررة. السماح للوصول إلى درجة حرارة الغرفة قبل الفتح. العمر الافتراضي للحلول الببتيد محدود؛ وينبغي استخدام محلول الببتيد بمجرد إعداده في أسرع وقت ممكن.
ما هو نقاء الببتيد الخام والببتيد المحلى؟ كيف يمكنك تنقية الببتيد؟ ما هي الشوائب؟
إعادة: بالنسبة للببتيدات القصيرة ذات التسلسلات العادية تحت 15aa، تكون بشكل عام 40-60% بواسطة HPLC للدرجة الخام؛ 50-70% بواسطة HPLC للدرجة المحلاة. كلما زاد طول الببتيد، قلت درجة نقاء الخام أو المحلى. تتم تنقية الببتيدات عمومًا بواسطة HPLC باستخدام الماء وتدرج الأسيتونيتريل. معظم الشوائب عبارة عن شظايا أو ببتيدات محذوفة، وببتيدات غير محمية بشكل كامل، وملح وماء متبقيين.
شرح نقاء الببتيد بواسطة HPLC ومحتوى الببتيد الإجمالي ومحتوى الببتيد المستهدف.
إعادة: يقوم Biorunstar بشحن الببتيدات وفقًا للوزن الإجمالي للمسحوق المجفف بالتجميد. يشتمل المسحوق المجفف بالتجميد على شوائب مثل الشظايا أو الببتيدات المحذوفة، والببتيدات غير المحمية بشكل كامل، وTFA والمياه المتبقية. يتم قياس نقاء الببتيد بواسطة HPLC. إنها كمية الببتيد الصحيحة بالنسبة لجميع التحاليل التي تمتص عند حوالي 214 نانومتر (يمتص رابطة الببتيد)، على الأرجح الحذف أو الاقتطاع أو التسلسلات غير المحمية بشكل كامل، وما إلى ذلك. نقاء الببتيد بواسطة HPLC لا يأخذ في الاعتبار الماء والأملاح التي عادة ما تكون موجودة في العينة. إجمالي محتوى الببتيد هو النسبة المئوية لإجمالي الببتيدات الموجودة مقارنة بكل شيء موجود في مسحوق الببتيد المجفف بالتجميد. يتم تحديد إجمالي محتوى الببتيد عن طريق تحليل محتوى النيتروجين. وبالتالي يمكن استنتاج محتوى الببتيد المستهدف في مسحوق الببتيد المجفف بالتجميد من خلال الصيغة: إجمالي محتوى الببتيد X نقاء الببتيد بواسطة HPLC.
ما هي طريقة وضع العلامات على الفلورسين؟
إعادة: FITC (إيزوثيوسيانات الفلورسين) هو السلائف المنشط المستخدم في وضع العلامات على الفلورسين. من أجل وضع العلامات الفعالة على Nterminal، استخدم أمينوهيكسانويل سبع ذرات
يتم إدخال المباعد (NH 2-CH 2-CH 2-CH 2-CH 2-CH 2-COOH) بين الفلوروفور (الفلوروسئين) و النهاية N للببتيد. يساعد هذا المباعد على فصل الفلوروفور من نقطة ارتباطه، مما قد يقلل من تفاعل الفلوروفور مع الجزيء الحيوي الذي يرتبط به ويجعله أكثر سهولة في الوصول إلى كواشف الكشف الثانوية.
يتم إدخال المباعد (NH 2-CH 2-CH 2-CH 2-CH 2-CH 2-COOH) بين الفلوروفور (الفلوروسئين) و النهاية N للببتيد. يساعد هذا المباعد على فصل الفلوروفور من نقطة ارتباطه، مما قد يقلل من تفاعل الفلوروفور مع الجزيء الحيوي الذي يرتبط به ويجعله أكثر سهولة في الوصول إلى كواشف الكشف الثانوية.
هل من الممكن وضع العلامات الطرفية C للبيوتين (أو FITC)؟
رد: نعم. يتم وضع العلامات الطرفية C للبيوتين (أو FITC) عن طريق إضافة بقايا ليسين عند الطرف C من الببتيد، ويتم ربط البيوتين (أو FITC) بسلسلة ليسين الجانبية عبر رابطة أميد. تتم إزالة شحنة ليسين الإيجابية.
ما هو طول الببتيد المناسب لإنتاج الأجسام المضادة؟
إعادة: بشكل عام، يوصى باستخدام بقايا الببتيد 10-25. يمكن أن يحتوي الببتيد الأطول على عدد أكبر من الحواتم، ولكن يمكن أن يكون لديه أيضًا فرصة أكبر لتشكيل هياكل ثانوية مستقرة ليست أشكالًا أصلية. الببتيد أقصر (<10aa) is generally not good unless there are valid reasons for it, such as potential sequence homology with a related family member or other proteins.
ما هي الخريطة؟
RE: MAPS أو الببتيد متعدد المستضدات هو ببتيد متفرع ترتبط فيه سلاسل الببتيد الخطية عند نهايتها C عبر قلب متعدد الليسين، وبالتالي زيادة حجم الجزيء بأكمله. يتم ذلك للقضاء على اقتران الببتيدات بـ KLH. ومع ذلك، يبدو أن تكوين الببتيدات على MAP أقل مرونة، وعادةً ما تتعرف الأجسام المضادة التي يتم الحصول عليها بواسطة MAP على البروتين المستهدف بشكل أقل من اقتران KLH التقليدي. بالإضافة إلى ذلك، لا يتم إنتاج ببتيد حر عند عمل MAPS، مما يجعل من الصعب إزالة الأجسام المضادة الموجهة من قلب البوليليسين. من الصعب تنقية MAPS بواسطة HPLC، ويتم توفير MAPS دون التحقق الشامل بسبب عدم تجانسها وحجمها الجزيئي الكبير.
لماذا يبدو محلول الببتيد المترافق مع KLH غائما؟
RE: KLH أو Keyhole Limpet Hemocyanin عبارة عن بروتين متراكم كبير (MW=4x105 – 1x107). بسبب حجمه وبنيته، فإن ذوبانه في الماء محدود، مما يسبب مظهرًا غائمًا. ولا يجوز أن يؤثر ذلك على المناعة ويمكن استخدام المحلول العكر في التحصينات.
هل يمكنك شرح قمم كتلة M+Na وM+K في أطياف MALDI؟
إعادة: من الشائع جدًا رؤية Na (الصوديوم) و K (البوتاسيوم) متقاربين في طيف MALDI. ويأتي الصوديوم والبوتاسيوم من الماء المستخدم في المذيبات الببتيدية. حتى الماء المقطر ومنزوع الأيونات يحتوي على كميات ضئيلة من أيونات الصوديوم والبوتاسيوم، والتي لا يمكن إزالتها تمامًا. تصبح هذه متأينة أثناء عملية المواصفات الجماعية MALDI وترتبط بمجموعات الكربوكسيل الحرة من الببتيد. نظرًا لعدم وجود نظام لتنقية المياه يمكنه إزالة كل أيون صوديوم أو بوتاسيوم من الماء، فإن رؤية مقاربات الصوديوم والبوتاسيوم في بعض الأحيان أمر شائع جدًا ولا يمكن تجنبه في مواصفات الكتلة MALDI. هذا ليس مؤشرا على أن الببتيد ليس نقيا، ولا ينبغي الخلط بينه وبين الوزن الجزيئي غير الصحيح.