ورم هجين وسط الانصهار والاختيار (HAT) 杂交瘤细胞融合筛选培养基(HAT)

产品信息 وصف المنتج

产品名称

اسم المنتج

杂交瘤细胞融合筛选培养基(HAT)

الورم الهجين الانصهار والاختيار المتوسط ​​(HAT)

货号Cat.No

بي آر إس-MED01

规格

مواصفة

500 مل / لتر

500 مل / زجاجة

产品组分

عناصر

DMEM نسبة الترشيح: 80%(体积比)

متوسط ​​قاعدة DMEM: 80% (حجم/حجم)

进口胎牛血清:10%(体积比)

مصل الأبقار الجنيني المستورد (FBS): 10% (حجم/حجم)

条件培养基:10%(体积比)

متوسطة مكيفة: 10% (حجم/حجم)

الجرعة: 100 مل/مل

البنسلين: 100 وحدة/مل

الجرعة: 100 مل/مل

ستربتومايسين: 100 وحدة/مل

عيار (هيبوكسانثين): 100 ميكرومتر

هيبوكسانثين: 100 ميكرومتر

غسول الجسم (الثيميدين):16uM

ثيميدين: 16 ميكرومتر

حجم العينة (أمينوبترين): 0.4 ميكرومتر

أمينوبترين: 0.4 ميكرومتر

其它添加物:多种细胞因子(足量)及添加剂

إضافات أخرى: السيتوكينات المختلفة (كمية كافية) والمكملات الغذائية

保存条件

شروط التخزين

-20 درجة 保存,有效期 18 个月.

تخزينها في -20 درجة. مدة الصلاحية: 18 شهرًا.

使用方法

تعليمات الاستخدام

培养基融化:

37 درجة 水浴融化本培养基،乙醇消毒外表面后置超净台备用؛

وقت النوم: غسل اليدين لمدة 3-5 دقائق في الصباح. في الواقع، لا يوجد شيء أفضل من ذلك.

ذوبان المتوسطة:

ذوبان الجليد المتوسطة في حمام مائي 37 درجة. مسح السطح الخارجي مع الإيثانول 70% ووضعه في خزانة السلامة الأحيائية للاستخدام.
ملاحظة: ظهور كمية صغيرة من المادة الندفية البيضاء بعد الذوبان أمر طبيعي. اسمح للوسط بالوقوف لمدة 3-5 دقائق حتى تستقر الكتل في القاع، ثم اجمع المادة الطافية بعناية لاستخدامها.

细胞融合与接种:

使用物理(电融合)或化学(常规PEG)的方法完成细胞融合,然后使用本培养基直接重悬融合细胞،以合适的密度(电融合推荐:1E4)细胞/孔-2E4 细胞/孔;PEG 胞推荐:5E4 细胞/孔-1E5 细胞/孔) و体积 (推荐:200ul/孔)铺 96 孔板,置37 درجة 5% ثاني أكسيد الكربون.

اندماج الخلايا والبذر:

إجراء دمج الخلايا باستخدام الطرق الفيزيائية (الانصهار الكهربائي) أو الكيميائية (التقليدية PEG). إعادة تعليق الخلايا المنصهرة مباشرة في هذه الوسيلة بكثافة وحجم مناسبين:

الصهر الكهربائي: 1 × 10⁴ – 2 × 10⁴ خلية/بئر

دمج PEG: 5 × 10⁴ – 1 × 10⁵ خلية/بئر
الحجم الموصى به: 200 ميكرولتر/بئر في طبق 96-جيدا.
احتضان عند 37 درجة، 5٪ CO₂ للثقافة.

培养液更换

融合后的第 4-8 日,根据细胞生长状态进行半换液或全换液培养;

استبدال المتوسطة:

في الأيام من 4 إلى 8 بعد الدمج، قم بإجراء استبدال جزئي أو كامل للوسط وفقًا لحالة نمو الخلايا.

克隆筛选:

当孔中细胞克隆长至合适大小后进行融合孔阳筛检测;

فحص الاستنساخ:

عندما تصل استنساخ الخلايا في الآبار إلى حجم مناسب، قم بإجراء فحص استنساخ إيجابي.

注意事项

احتياطات

本产品有一定毒性,仅用于杂交瘤细胞的筛选及培养,不可用于 培养活体动物,诊断或治疗药物用.

هذا المنتج سام ومخصص فقط لاختيار وثقافة خلايا الورم الهجين. ولا يجوز استخدامه لتربية الحيوانات الحية أو لأغراض التشخيص أو التطبيقات العلاجية.

本产品适用于 HGPRT 筛选系统的杂交瘤细胞的筛选培养,不适用于 TK تم تصميم هذا المنتج بواسطة HGPRT (如 NS1، SP2/0 等).

هذا المنتج مناسب لاختيار وزراعة خلايا الورم الهجين باستخدام نظام اختيار HGPRT. ولا ينطبق على المعارف التقليدية أو أنظمة الاختيار الأخرى. لا يمكن استخدام هذا الوسيط للاستنبات المباشر للخلايا التي تعاني من نقص HGPRT- (على سبيل المثال، NS1، SP2/0).

يجب أن تكون درجة الحموضة 7.2 ~ 7.4، والرقم الهيدروجيني هو 7.2 ~ 7.4.

هذا المنتج عبارة عن محلول معقم بدرجة حموضة تتراوح بين 7.2-7.4. يجب أن يتم تنفيذ جميع المناولة في ظل ظروف معقمة.